Los feocromocitomas y paragangliomas (PPGLs) son tumores neuroendocrinos raros (incidencia de 3-8/millón de habitantes) genéticamente muy heterogéneos que implican más de 20 genes. El diagnóstico se realiza mediante paneles de Next Generation Sequencing (NGS), pero a menudo se encuentran variantes de significado incierto (VUS) que requieren una estrategia de clasificación.

Este estudio tuvo como objetivo evaluar la utilidad de ensayos complementarios para clasificar las VUS en PPGL.

Se analizaron 1380 muestras de 1210 pacientes con PPGL con un panel de NGS personalizado que contiene 37 genes relacionados con la enfermedad. Para las VUS detectadas, se utilizaron predictores bioinformáticos y pruebas complementarias, incluyendo evaluación por inmunohistoquímica (IHC) de los anticuerpos SDHB, SDHA, FH, 2SC, 5hmC, DLST, estudio de splicing alternativo, metilación de promotores y expresión génica.

Identificamos 530 mutaciones patogénicas y 137 VUS. La IHC mostró una eficiencia de 91-100% para clasificar VUS, dependiendo del anticuerpo. En la mayoría de los casos con ausencia de expresión de SDHB por IHC y sin mutaciones en los genes SDHs, se identificó el mecanismo genético mediante análisis de metilación.

Se recomienda el estudio genético de pacientes con PPGL utilizando material tumoral, dado que se obtiene un diagnóstico en el 76% de los casos (se identifican mutaciones germinales, somáticas y eventos postcigóticos).

La evaluación de la IHC de SDHB permite clasificar prácticamente el 100 % de las variantes en los genes SDHs. Otros ensayos de IHC, como SDHA, 5hmC, son eficaces para VUS en genes del ciclo de Krebs.

Se propone un protocolo diagnóstico basado en la IHC de SDHB, el análisis del DNA tumoral por NGS y MLPA de línea germinal para una evaluación completa de las alteraciones genéticas en pacientes con PPGL. La interpretación de VUS detectadas en otros genes, determinará la evaluación de otros anticuerpos.