DFNB1 es la hipoacusia neurosensorial no sindrómica más frecuente en la mayoría de las poblaciones. Se hereda de forma autosómica recesiva y se debe a la inactivación de ambos alelos del gen GJB2, que codifica la conexina-26, una proteína de las uniones intercelulares comunicantes (gap junctions). El espectro mutacional incluye todo tipo de mutaciones en la región codificante y sitios consenso de splicing de GJB2. Se han descrito además grandes deleciones, frecuentes en muchas poblaciones, que eliminan secuencias reguladoras esenciales para la expresión de GJB2, dejando este gen intacto. Objetivo del trabajo: construir un modelo murino de DFNB1 generando una deleción de 275 kb equivalente a la deleción del(GJB6-D13S1830), que es la más frecuente en humanos.

Generación de la deleción mediante edición CRISPR-Cas9 en embriones de ratón, comprobación de la deleción por PCR (ADN de cola), cruzamientos de ratones durante 5 generaciones para la obtención de una línea congénica. Extracción de ARN de cóclea para la realización de PCR cuantitativa. Estudio audiológico e histopatológico de los ratones homocigotos y silvestres.

Los ratones homocigotos presentan hipoacusia severa-profunda en todas las frecuencias, recapitulando el fenotipo observado uniformemente en pacientes homocigotos para del(GJB6-D13S1830). Así mismo, la cuantificación de ARN coclear de estos ratones mostró una reducción casi total de la expresión de Gjb2, y los estudios inmunohistoquímicos revelaron una ausencia completa de conexina-26 en la cóclea. El análisis histológico de los ratones homocigotos mostró grandes alteraciones citoarquitectónicas: engrosamiento de la membrana tectoria, células del surco interno agrandadas y unidas a la membrana tectoria, ausencia o reducción del túnel de Corti, y membrana de Reissner alargada y en ocasiones plegada. En general, las células ciliadas estaban preservadas.

Este modelo murino, el primero de tipo no condicional de la hipoacusia DFNB1, permitirá profundizar en sus mecanismos fisiopatológicos y avanzar en el diseño de nuevas terapias.