Las Distrofias hereditarias de retina (DR) son un grupo heterogéneo de patologías que afectan a las células de la retina provocando la pérdida de la visión. Están causadas por mutaciones en más de 300 genes y no disponen de tratamiento efectivo. Este estudio pretende corregir las variantes DR mediante edición génica para su potencial aplicación en medicina traslacional.

Se han utilizado las tecnologías de edición génica CRISPR/Cas9 y TALEN en células madre derivadas de pacientes (hiPSCs) afectos de las siguientes DR: retinosis pigmentaria, enfermedad de Stargardt, enfermedad de Best o Acromatopsia. Se ha comprobado la zona de edición y los potenciales off-targets mediante secuenciación Sanger y se han generado modelos de organoides de retina para estudiar la posible recuperación funcional del gen.

Hemos reparado las variantes patogénicas en 7 líneas de hiPSCs mediante CRISPR/Cas9 o TALEN de forma precisa y sin defectos off-target. La tasa de éxito en la corrección ha alcanzado un máximo del 80%. Las mutaciones de tipo inserción/deleción y las que se presentan en homocigosis son las que han sido reparadas con mayor eficiencia, superando, en cada caso, el 50% de los clones analizados. Hemos verificado que el uso de sgRNAs que contengan la mutación permite discriminar entre alelos heterocigotos de forma efectiva. Por último, las células editadas y diferenciadas a células de la retina han mostrado la reversión del fenotipo asociado a la patología.

La edición génica se postula como una aproximación terapéutica transcendental para la corrección permanente del ADN del propio paciente. Esta metodología nos ha permitido revertir todas las variantes estudiadas sin generar defectos off-target, postulándose, así, como una terapia potencialmente segura. Aunque se ha conseguido corregir algunas mutaciones mediante TALENs, CRISPR/Cas9 ha sido la tecnología más potente y con mayor tasa de éxito.