AEGH2023

NUEVO MÉTODO DE ESTABILIZACIÓN Y SECADO DE DNA PARA ALMACENAMIENTO A TEMPERATURA AMBIENTE. Back
Poster Nº: P0405
Autores: Cátia D. Quintas Faria; Rosa Pinto-labajo; María Pérez-caro; María Dolores Tabernero; Ana Henández; Mario Morgado; Marta Martín-ayuso
Area: 12. Nuevas aproximaciones y tecnologías diagnósticas
 
01. Introducción y Objetivos: Breve introducción indicando el propósito del estudio.:

El método actual para la conservación a largo plazo del DNA es la congelación a -80 ºC, lo que implica altos costes de mantenimiento, transporte, energía, espacio y medidas de seguridad. Se han realizado diferentes intentos de conservación en seco de materiales biológicos, sin embargo, no existen estándares en el tratamiento de las muestras, flujo de trabajo y condiciones de almacenamiento que permitan obtener y mantener a temperatura ambiente (TA) muestras de alta calidad durante largos periodos de tiempo.

El objetivo es proporcionar una solución estandarizada para la estabilización, secado y almacenamiento de DNA capaz de mantener la calidad e idoneidad del material genético procesado y almacenado.

02. Métodos: Descripción concisa de los métodos utilizados:

Se almacenaron múltiples alícuotas de 6 muestras de DNA en paralelo bajo 3 condiciones: congeladas a -80 ºC; secadas-almacenadas a 22 ºC y secadas-almacenadas a 60 ºC. Se evaluó la integridad y pureza de las muestras de DNA en diferentes momentos y condiciones durante los 18 meses de almacenamiento siguiendo el “Programa de Control de Calidad de Muestras” del Banco Nacional de ADN, Carlos III.  Adicionalmente, se realizó un análisis Cytoscan 750K, así como un análisis de la secuencia del exoma completo.

03. Resultados: Resumen de los resultados obtenidos:

El almacenamiento equivalente a 21 años a TA no afectaron significativamente a la integridad del DNA evaluada por DIN, Long muliplex PCR, ni alteraciones de los valores de pureza. La secuencia del exoma completo mostró un recall del 99% con respecto a la muestra almacenada a -80ºC en todos los tiempos analizados y el análisis Cytoscan 750K reveló el mismo patrón de alteraciones en todas las muestras.

04. Conclusiones: Basadas en los resultados obtenidos:

En base a los resultados obtenidos se demuestra que el sistema de estabilización y secado propuesto es adecuado para el almacenamiento a largo plazo del ADN a RT, preservando su integridad y pureza y permitiendo su uso en las técnicas moleculares más restrictivas.